【摘 要】
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目的 探讨枸杞多糖(LBP)对2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)染毒初断乳大鼠神经行为和海马神经元细胞凋亡的保护作用.方法 SPF级初断乳SD大鼠48只,雌雄各半,随机分为Control组、2,4-D组、LBP组和2,4-D+LBP组各12只,旷场实验、高架十字迷宫观察实验大鼠行为学变化,试剂盒测定大鼠血清抗氧化酶活性,HE染色观察大鼠海马CA3区锥体细胞的形态,TUNEL荧光染色法观察海马CA3区神经元凋亡,免疫组织化学方法检测海马组织凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果(1)2,4-D组大鼠脑重和脑
【机 构】
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宁夏医科大学公共卫生与管理学院职业卫生与环境卫生系,银川 750004;宁夏环境因素与慢性病控制重点实验室,银川 750004;#s
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目的 探讨枸杞多糖(LBP)对2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)染毒初断乳大鼠神经行为和海马神经元细胞凋亡的保护作用.方法 SPF级初断乳SD大鼠48只,雌雄各半,随机分为Control组、2,4-D组、LBP组和2,4-D+LBP组各12只,旷场实验、高架十字迷宫观察实验大鼠行为学变化,试剂盒测定大鼠血清抗氧化酶活性,HE染色观察大鼠海马CA3区锥体细胞的形态,TUNEL荧光染色法观察海马CA3区神经元凋亡,免疫组织化学方法检测海马组织凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果(1)2,4-D组大鼠脑重和脑脏器系数降低,大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性降低,丙二醛(MDA)含量升高(P均<0.01);海马CA3区锥体细胞数减少,光镜下观察细胞间隙增宽,排列不整齐,细胞与周围组织联系疏松,部分胞核固缩呈三角形或不规则形;大鼠中央格停留时间延长,穿行格数、直立次数和修饰时间减少,进入开放臂次数减少,开放臂停留时间缩短,开放臂停留时间百分比降低(P均<0.05);(2)与2,4-D组比较,2,4-D+LBP组大鼠脑重和脑脏器系数增加,血清SOD和GSH-Px活性升高,MDA含量降低(P均<0.01);海马CA3区锥体细胞数量较2,4-D组增多,部分细胞恢复正常形态(P均<0.01);中央格停留时间缩短,穿行格数、直立次数和修饰时间均延长,进入开放臂次数增多,开放臂停留时间延长,开放臂停留时间百分比升高(P均<0.05);(3)TUNEL染色结果显示,2,4-D组大鼠海马神经元阳性细胞数增多,细胞凋亡率升高(P均<0.01),2,4-D+LBP组凋亡细胞数少于2,4-D组,呈现绿色或淡绿色荧光;(4)免疫组织化学方法发现2,4-D组大鼠海马组织Bcl-2表达降低,Bax表达升高,Bcl-2/Bax比值降低(P均<0.05),2,4-D+LBP组大鼠海马CA3区Bcl-2表达升高,Bax表达降低,Bcl-2/Bax比值升高(P均<0.05),神经元染色以胞浆有棕黄色物质沉积为主,也有胞膜或核膜染色.结论 2,4-D染毒大鼠表现出抑郁和焦虑状态,大鼠血清抗氧化酶活性降低,大鼠海马CA3区锥体细胞受损,引起海马神经元细胞凋亡,LBP具有抗氧化和抑制海马神经元细胞凋亡的作用.
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