【摘 要】
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目的改良传统Sanger测序技术,建立16S r RNA快速测序法,并应用于常见病原微生物的鉴定。方法以铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌标准菌株为实验对象,建立16S r RNA
【机 构】
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汕头大学医学院公共卫生与预防医学教研室; 汕头出入境检验检疫局; 汕头市中心医院;
【基金项目】
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广东省汕头市科技项目(汕市财文[2009]387号-126);广东出入境检验检疫局科技项目(2012GDK45);广东省感染病与分子免疫病理重点实验室
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目的改良传统Sanger测序技术,建立16S r RNA快速测序法,并应用于常见病原微生物的鉴定。方法以铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌标准菌株为实验对象,建立16S r RNA快速测序鉴定方法。再以自医院分离的,已经传统生化方法鉴定的铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌各30株进行方法验证。结果采用本方法进行细菌鉴定,可以正确、快速鉴定所有3种标准菌株。临床样品中,所有金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌均可获得与传统生化方法完全一致的带定结果,而在30株大肠埃希菌中,只有8株(占26.7%)被鉴定为大肠埃希氏菌,有10株(占33.3%)被鉴定为宋氏志贺菌,12株(占40%)被鉴定为痢疾志贺菌。结论本方法适用于铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的快速准确鉴定,对大肠埃希菌则不完全适用。
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