【摘 要】
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用两步酶解法提取拟南芥保卫细胞原生质体。首先使用作用比较缓和、浓度为0.8%的绿木酶Cellulysin 25℃,120r/min水浴振荡30min,促使原生质体游离出来;然后再使用1.5%的纤维素酶Cellu
【机 构】
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新疆农业大学园艺学院,北京农学院生物技术系,北京农学院组培实验中心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(项目编号:30700428);北京市自然科学基金项目(项目编号:5072009);北京市科技新星计划项目(项目编号:2006B26)资助;“北京市属市管高校人才强教计划资助项目”资助
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用两步酶解法提取拟南芥保卫细胞原生质体。首先使用作用比较缓和、浓度为0.8%的绿木酶Cellulysin 25℃,120r/min水浴振荡30min,促使原生质体游离出来;然后再使用1.5%的纤维素酶Cellulase RS和0.02%的果胶酶Y-23组成的酶解液,22℃,60-70r/min,酶解40~60min,制备拟南芥保卫细胞原生质体。结果表明,两步酶解法可以制备出活性较高、适于进行膜片钳等后续试验的原生质体。
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