【摘 要】
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目的 观察重组细粒棘球绦虫抗原mMDH(rEg.mMDH)诱导树突状细胞(Dendritic cells,DC)产生的免疫应答. 方法 用rEg.mMDH体外致敏小鼠骨髓DC细胞,分为空白对照组、HF组、rEg.mMD
【机 构】
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宁夏医科大学基础医学院,宁夏银川750001;宁夏医科大学基础医学院,宁夏银川750001;宁夏医科大学包虫病重点研究室
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目的 观察重组细粒棘球绦虫抗原mMDH(rEg.mMDH)诱导树突状细胞(Dendritic cells,DC)产生的免疫应答. 方法 用rEg.mMDH体外致敏小鼠骨髓DC细胞,分为空白对照组、HF组、rEg.mMDH组、LPS组、HF+-LPS组和rEg.mMDH+ LPS组.电镜观察各组DC的形态;流式细胞仪检测各组DC的吞噬功能及表面分子CD80、CD86、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)及CD40表达情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组DC培养上清液中细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12p70(IL-12p70)及TNF-α的含量. 结果 优化条件筛选出rEg.mMDH作用DC的最佳浓度为1μg/ml,最佳时间为20h.电镜观察rEg.mMDH和HF组DC具有突起的细胞数目少;DC表面分子CD80、MHCII表达水平与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);且具有良好的吞噬能力.当加入LPS作用后,rEg.mMDH组DC表面的突起增多,含突起的DC数目从30％o增加至52％o,吞噬能力降低,MHCII、CD80、CD40表达量不同程度增高;ELISA检测rEg.mMDH组TNF-α、IL-6、IL-10含量高于空白对照组及LPS组(均P＜0.01),与LPS联合作用后IL-6、IL-10显著降低(P＜0.05),IL-12p70含量显著升高(P＜0.01);HF组与HF+LPS组各细胞因子含量变化差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 rEg.mMDH促进DC的成熟能力较弱,但刺激后的DC具有良好的吞噬功能,通过释放高含量的IL-10、IL-6,可能激活Th2型免疫应答;联合LPS,诱导DC成熟的能力增强,高表达IL-12p70并降低IL-10、IL-6的含量.
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