目的 探讨谷氨酸信号通路在恶性黑素瘤发病中的作用机制.方法 取对数生长期恶性黑素瘤WM451LU细胞,分为6组,①阴性对照组加入100μl的PBS液;②MK801组加入100 μmol/L NM-DAR非竞争性拮抗剂MK801;③CPCCOEt组加入10 μmol/L代谢型谷氨酸受体1(mGluR1)非竞争性拮抗剂CPCCOEt;④MAP2组加入腺病毒-微管相关蛋白2a(Ad-MAP2a);⑤MK801+MAP2组加入100 μmol/L MK801和Ad-MAP2a;⑥CPCCOEt+MAP2组加入10 μmol/L CPCCOEt和Ad-MAP2a.用Western印迹观察转染Ad-MAP2a载体后WM451LU细胞中离子型谷氨酸受体甲基-D-天冬氨酸受体2A(NMDAR2A)的变化.并通过细胞迁移、侵袭实验分别研究上调MAP2表达与MK-801、CPCCOEt分别或共同作用下,肿瘤细胞的迁移及侵袭性的变化.同时进行了裸鼠恶性黑素瘤动物模型的体内研究,比较上述药物的体内抑瘤作用.结果 Western印迹发现,转染Ad-MAP2a的WM451LU细胞NMDAR2A表达降低.体外迁移实验结果显示,MAP2组发生迁移的细胞为(117.04±2.76)个/高倍视野(HP),MK801组(107.64±6.50)个/HP,CPCCOEt组(97.36±4.79)个/HP,MK801+MAP2组(43.28±3.02)个/HP,CPCCOEt+MAP2组(30.76±3.97)个/HP,与阴性对照组(152.3±5.75)个/HP比较,P值均＜0.01.体外侵袭实验结果显示,MAP2组发生侵袭的细胞数为(102.56±3.81)个/HP,MK801组(98.21±5.52)个/HP,CPCCOEt组(118.23±7.96)个/HP,与阴性对照组(178.43±8.75)个/HP相比,P值均＜0.05;MK801+MAP2组(43.89±5.08)个/HP,CPCCOEt+MAP2组(58.45±6.88)个/HP,与阴性对照组相比,P值均＜0.01.裸鼠体内研究发现,用药第15天时,MAP2组肿瘤体积为(224.02±46.19)mm3,MK801组(160.33±33.91)mm3,MK801+MAP2组(91.49±21.48)mm3,CPCCOEt组(202.30±52.37)mm3,CPCCOEt+MAP2组(111.13±69.81)mm3,与阴性对照组(342.70±60.92)mm3比较,P值均＜0.01.结论 体外阻滞恶性黑素细胞的谷氨酸信号通路可抑制恶性黑素细胞的迁移及侵袭;体内阻滞恶性黑素细胞的谷氨酸信号通路可抑制恶性黑素瘤的增殖,并可使肿瘤细胞的形态发生变化。
谷氨酸信号通路调控恶性黑素瘤侵袭与增殖的实验研究
【摘 要】
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目的 探讨谷氨酸信号通路在恶性黑素瘤发病中的作用机制.方法 取对数生长期恶性黑素瘤WM451LU细胞,分为6组,①阴性对照组加入100μl的PBS液;②MK801组加入100 μmol/L NM-DAR非竞争性拮抗剂MK801;③CPCCOEt组加入10 μmol/L代谢型谷氨酸受体1(mGluR1)非竞争性拮抗剂CPCCOEt;④MAP2组加入腺病毒-微管相关蛋白2a(Ad-MAP2a);⑤MK
【机 构】
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116011,大连医科大学附属第一医院皮肤科,116011,大连医科大学附属第一医院中心实验室,辽宁师范大学生命科学学院生物技术与分子药物研发重点实验室,大连医科大学实验动物中心,大连医科大学中心实验
【出 处】
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中华皮肤科杂志
【发表日期】
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2011年44期
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