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为建立一种基因Ⅰ型和Ⅱ型猪伪狂犬病毒(PRV)鉴定方法,对PRV全基因组序列进行生物信息学分析,在Ⅱ型PRV gC基因上鉴定到一段不同于Ⅰ型PRV的47 bp长的多位点稳定差异基序。该方法能特异性区分基因Ⅰ型和Ⅱ型PRV,检测猪瘟病毒、猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪蓝耳病病毒、猪圆环病毒2型及3型时呈阴性。两种分型方法针对Ⅰ、Ⅱ型PRV的最低检测限均为1×104copies/L。44份猪组织病料的单重及双重PCR检测均显示,5份样品为Ⅰ型PRV,1份样品为Ⅱ型PRV。结果表明