TLR4胞外段在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化及鉴定

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jiangyao366

【摘要】

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目的构建谷胱甘肽转硫酶-TLR4融合蛋白表达载体,并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达.方法利用PCR从含TLR4全长cDNA序列的质粒中扩增其胞外段,约1 800 bp,然后将其克隆入

【作者】

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段朝霞蒋建新杨清武张道杰陈永华朱佩芳

【机构】

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第三军医大学大坪医院野战外科研究所四室

【出处】

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免疫学杂志

【发表日期】

：

2003年4期

【关键词】

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TLR4 大肠杆菌可溶性表达纯化鉴定 TLR4 Fusion protein Soluble expression Purification

【基金项目】

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国家重点基础研究发展计划(973计划)，国家自然科学基金

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目的构建谷胱甘肽转硫酶-TLR4融合蛋白表达载体,并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达.方法利用PCR从含TLR4全长cDNA序列的质粒中扩增其胞外段,约1 800 bp,然后将其克隆入pMD18-T载体中.测序确证后重组入谷胱甘肽转硫酶融合表达载体pGEX-4T-1中,并用IPTG诱导其在大肠杆菌中表达.结果 PCR扩增的TLR4胞外区基因序列与GenBank数据库中的序列一致.重组质粒经酶切鉴定及测序证实,TLR4基因已正确插入到pGEX-4T-1中.重组表达质粒转化感受态大肠杆菌HB101后用IP

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