脂质体介导报告基因Lac—Z导人大鼠原位移植肺细胞的实验研究

来源 :中国医师杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tecra1234
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目的 通过体外途径的脂质体介导将报告基因(Lac—z基因)转入移植肺并表达,证明将外源基因转入移植肺进行基因治疗的可行性。方法首先建立大鼠左肺原位移植模型和经肺静脉逆行灌注技术。然后将18只SD大鼠随机分为转基因组、脂质体组和空白时照组,每组各6只。转基因组经肺静脉将质粒载体DNA(PSV~β—gal)/脂质体Lipofectin@(D0TMA/DOPE)复合物灌注入移植肺;脂质体组和空白时照组则分别灌注脂质体和0.9%生理盐水。手术1d以后获取肺脏,冰冻切片,经X-gal组织化学染色检测Lac—z基因的转染和表达情况。结果转基因组3例都检测到Lac—z基因的表达。其表达位于气管上皮细胞和肺泡上皮细胞内,呈点片状兰斑。而脂质体组和空白时照组则均未检测到Lac—z基因的表达。结论以质粒表达载体PSV—β—gal/脂质体Lipofectin R复合物的形式,经肺血管(静脉逆行)灌注方式,把外源基因转入移植肺是可行的。本实验为进一步开展大鼠肺移植术后缺血一再灌注损伤、免疫排斥反应和感染的功能性基因治疗实验研究的可行性提供了依据。

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