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在水质监测机器鱼平台的基础上,针对传统正六边形路径算法仅仅根据浓度梯度追踪化学源的不足,提出了应用于突发污染事故中的基于浓度梯度-逆流路径算法定位水下污染源,同时考虑浓度变化和水流作用的影响。并在较为真实的河流污染源二维移流扩散模型中进行了仿真,结果表明该算法能够以较少的步次更精确地跟踪、定位水下污染源,可以避免陷入局部极值点,收敛性好。