【摘 要】
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目的 探讨在结肠癌细胞系中,含IQ模序GTP酶激活蛋白(IQGAP)2的启动子甲基化状态及IQGAP2对结肠癌细胞侵袭的影响.方法 在人结肠癌RKO细胞株中,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、脱甲基化试剂5-aza-2\'-deoxycytidine处理,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)法、甲基化测序检测IQGAP2基因甲基化状态.利用转染pcD-NA4.0A-IQGAP2质粒,增强IQGAP2蛋白表达,用细胞迁移侵袭(Transwell)实验检测结肠癌细胞的侵袭能力.结果 采用RT-P
【机 构】
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延边大学附属医院消化内科,吉林 延吉 133000;延边大学附属医院药学部,吉林 延吉 133000
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目的 探讨在结肠癌细胞系中,含IQ模序GTP酶激活蛋白(IQGAP)2的启动子甲基化状态及IQGAP2对结肠癌细胞侵袭的影响.方法 在人结肠癌RKO细胞株中,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、脱甲基化试剂5-aza-2\'-deoxycytidine处理,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)法、甲基化测序检测IQGAP2基因甲基化状态.利用转染pcD-NA4.0A-IQGAP2质粒,增强IQGAP2蛋白表达,用细胞迁移侵袭(Transwell)实验检测结肠癌细胞的侵袭能力.结果 采用RT-PCR扩增,发现IQGAP2基因完全不表达,经5-aza-2\'-deoxycytidine处理,IQGAP2基因表达明显增强.利用MSP检测IQ-GAP2基因甲基化,可见甲基化引物扩增条带,未见非甲基化引物扩增条带.通过IQGAP2甲基化测序,发现IQGAP2基因启动子存在高甲基化引起基因沉默.转染pcDNA4.0A-IQGAP2质粒,增强IQGAP2蛋白表达,抑制结肠癌细胞的侵袭能力.结论 在结肠癌细胞系中,IQGAP2通过启动子的高甲基化引起基因沉默,IQGAP2抑制结肠癌细胞的侵袭.
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