目的 采用RNA干扰技术(RNAi)技术观察低氧诱导因子-1α (HIF-1α)对人膀胱癌细胞株BIU-87增殖、侵袭及转移的影响.方法 体外培养BIU-87细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot检测低氧(90％氮气+5％氢气+5％二氧化碳)和常氧下及HIF-1α-siRNA转染前后BIU-87中HIF-1α、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达；采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测HIF-1α-siRNA转染后的细胞增殖水平,细胞划痕和Transwell试验检测迁移和侵袭能力.结果 低氧8、24h条件下,HIF-1α蛋白(0.56 ±0.08、1.33 ±0.21)、MMP-2 mRNA(1.85±0.21、2.94±0.29)、MMP-2蛋白(0.68 ±0.11、1.37 ±0.22)、MMP-9 mRNA(2.08±0.32、3.49±0.44)、MMP-9蛋白(0.89 ±0.12、1.40±0.23)表达与正常氧条件比较HIF-1α蛋白(0.33±0.05)、MMP-2 mRNA(0.95 ±0.13)、MMP-2蛋白(0.47±0.07)、MMP-9 mRNA(1.21±0.17)、MMP-9蛋白(0.58±0.14)表达均显著升高(均P＜0.05),HIF-1α mRNA(1.05 ±0.09、0.96 ±0.11)与正常氧条件(1.16±0.13)比较无明显变化；HIF-1α-siRNA转染后与转染前比较能有效沉默HIF-1α；与转染前(1.12 ±0.17、315.25±40.94、96.86±9.85)比较,HIF-1 α-siRNA能降低增殖、侵袭及迁移细胞数(0.63 ±0.08、139.62±19.67、69.17±7.39)(均P＜0.05); BIU-87中PCNA mRNA(0.57±0.07)、PCNA蛋白(0.52±0.09)、MMP-2 mRNA(0.64±0.08)、MMP-2蛋白(0.53±0.07)、MMP-9 mRNA(0.49±0.06)、MMP-9蛋白(0.69±0.07)表达与转染前比较显著降低(0.99±0.14、0.80±0.13、1.06±0.13、0.87 ±0.12、0.99±0.12、1.12±0.14) (P ＜0.05).结论 低氧下,HIF-1 α-siRNA通过沉默HIF-1α,降低PCNA、MMP-2、MMP-9表达而抑制膀胱癌细胞增殖、侵袭及转移。
低氧诱导因子-1α沉默对膀胱癌细胞株BIU-87增殖、侵袭及转移的影响
【摘 要】
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目的 采用RNA干扰技术(RNAi)技术观察低氧诱导因子-1α (HIF-1α)对人膀胱癌细胞株BIU-87增殖、侵袭及转移的影响.方法 体外培养BIU-87细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot检测低氧(90％氮气+5％氢气+5％二氧化碳)和常氧下及HIF-1α-siRNA转染前后BIU-87中HIF-1α、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-
【机 构】
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050051石家庄,河北省人民医院泌尿外科,050051石家庄,河北省人民医院泌尿外科,050051石家庄,河北省人民医院泌尿外科,050051石家庄,河北省人民医院药剂科
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2013年30期
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