观察毛壳素对人肝内胆管癌细胞CCLP-1活性的影响并探讨其相关作用机制。
方法毛壳素以不同浓度分为1组(0 nmol/L)、2组(50 nmol/L)、3组(100 nmol/L)和4组(200 nmol/L)与CCLP-1细胞共培养，细胞增殖法检测CCLP-1细胞活性；吉姆赛染色观察CCLP-1细胞形态学改变；流式细胞技术检测细胞凋亡；荧光显微镜检测CCLP-1胞内活性氧(ROS)；蛋白质印迹法检测凋亡信号调节激酶1(ASK-1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白表达。
结果细胞增殖法提示毛壳素随浓度增加及作用细胞时间延长，细胞活性抑制率上升，呈剂量-效应关系(F＝102.369，P＝0.000)及时间-效应关系(F＝141.377，P＝0.000)，并剂量与时间呈交互作用(F＝15.418，P＝0.000)；CCLP-1细胞经毛壳素作用后吉姆赛染色可见细胞核固缩，出现分页状、碎片形状及凋亡小体。流式细胞技术显示细胞总凋亡率：1组：(6.42±3.10)%；2组：(10.82±2.84)%；3组：(13.67±1.71)%和4组：(17.91±6.16)%，总凋亡率呈增多趋势并差异有统计学意义(F＝4.788，P＝0.034)；荧光显微镜检测实验组细胞内荧光值(24.126±9.587)高于空白组荧光值(5.114±1.937)并差异有统计学意义(P＝0.006)；Western blot法实验显示磷酸化ASK-1蛋白表达量：0.255±0.150 (1组)、0.680±0.039(2组)、1.356±0.125(3组)和1.916±0.367(4组)。磷酸化JNKs蛋白表达量：0.493±0.233(1组)、1.542±0.573(2组)、1.639±0.342(3组)、2.480±1.001(4组)，提示随毛壳素浓度增加各蛋白表达量均上调(ASK-1：F＝36.946，P＝0.000，JNKs：F＝5.291，P＝0.027)。
结论毛壳素对CCLP-1细胞有显著抑制作用并诱导其凋亡，并且ROS-ASK-1/JNKs信号参与CCLP-1细胞凋亡。