【摘 要】
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[目的]本文旨在探索猪血管紧张素转化酶2(ACE2)在大肠杆菌中最佳表达条件和纯化蛋白的最佳方法。[方法]将已构建好的猪重组表达载体pET-32a-ACE2转染至大肠杆菌BL21(DE3),通
【机 构】
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南京农业大学农业农村部动物生理生化重点开放实验室
【基金项目】
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江苏省高校优势学科建设工程资助项目(PAPD).
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[目的]本文旨在探索猪血管紧张素转化酶2(ACE2)在大肠杆菌中最佳表达条件和纯化蛋白的最佳方法。[方法]将已构建好的猪重组表达载体pET-32a-ACE2转染至大肠杆菌BL21(DE3),通过改变IPTG诱导浓度以及诱导时间来对诱导表达条件进行筛选,实现目的蛋白高效表达后选用Ni^2+-NTA亲和层析和KCl染色切胶2种方法,对获得的重组猪pET-32a-ACE2融合蛋白进行纯化,SDS-PAGE和免疫印迹等分析鉴定表达产物。[结果]当IPTG浓度为1mmol·mL^-1、诱导时间为10h时,
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