【摘 要】
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采用PCR和定点突变的方法获得c-Ha-ras突变基因,将其克隆到pcDNA3载体上,得到含有c-Ha-ras 61密码子突变和核苷酸2713突变的质粒pcDNA3-ras2.对重组质粒进行瞬时表达,Western
【机 构】
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中国药科大学生物技术研究中心,上海市转基因研究中心
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采用PCR和定点突变的方法获得c-Ha-ras突变基因,将其克隆到pcDNA3载体上,得到含有c-Ha-ras 61密码子突变和核苷酸2713突变的质粒pcDNA3-ras2.对重组质粒进行瞬时表达,Western Blot检测到强阳性条带.酶切重组质粒,回收含有CMV启动子-目的基因-下游调控序列的4.3kb片段,然后将其显微注射到ICR小鼠受精卵中.将注射后的受精卵移入假孕母鼠的输卵管进行母体孕育.小鼠出生3周后,PCR和Souther Blot检测证实有4只小鼠基因组中整合了外源c-Ha-ras突变
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