兔抗Myosin X多克隆抗体的制备及初步应用

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为制备兔抗肌球蛋白X (myosin X,Myo X)多克隆抗体,合成了含有Myo X N端1000~1021个氨基酸的多肽,将纯化后的多肽与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)进行交联;通过背部皮下免疫新西兰大白兔获得免疫血清,并通过ELISA、免疫印迹、免疫荧光等分析对免疫血清进行了初步的验证.结果表明:经过4次免疫后可获得免疫血清,ELISA检测表明抗体终效价达到1∶51 200,抗原吸附实验进一步证明了此多克隆抗体的特异性.利用获得的多克隆抗体检测了多种组织中Myo X的表达,发现兔抗Myo X多克隆抗体可特异性识别多种组织中的Myo X.免疫荧光染色表明该抗体可以显示Myo X在COS-7细胞、NLT细胞和神经元中的分布.
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