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目的：建立在线固相萃取富集-高效液相色谱法（On-line SPE-HPLC）测定牛奶中黄曲霉毒素M1。方法：固相萃取富集柱填料为SB-C18,上样溶剂和淋洗溶剂均为纯水,转移溶剂为乙腈-水（20：80,V/V）,分析测定溶剂为乙腈-水（15：85,V/V）。结果：黄曲霉毒素M1检测的线性方程为Y=2.52746X 0.067,相关系数为0.99906;检出限为0.04μg/kg;定量限为0.10μg/kg;基质4个水平添加回收率（n=6）在98%～105.7%;6次加标回收相对标准偏差在0.79%～2.