【摘 要】
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利用溴麝香草酚蓝作为反应指示剂,快速地筛选到产对映选择性脂肪酶菌株GXU33(Geotrichumsp.),此酶能够拆分外消旋扁桃酸甲酯产生(S)-扁桃酸。此菌株最适生长、产酶条件为橄榄
【机 构】
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广西大学生命科学与技术学院微生物及植物遗传工程教育部重点实验室
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利用溴麝香草酚蓝作为反应指示剂,快速地筛选到产对映选择性脂肪酶菌株GXU33(Geotrichumsp.),此酶能够拆分外消旋扁桃酸甲酯产生(S)-扁桃酸。此菌株最适生长、产酶条件为橄榄油10 g/L,酵母粉5 g/L,Na2HPO4.12H2O3.5 g/L,KH2PO41.0 g/L,MgSO4.7H2O0.2g/L,pH7.0,28℃,200 r/min。PMSF和蛋白酶K对菌株生长没有影响,PMSF显著抑制酶活,蛋白酶K具有保护酶活力的作用。该脂肪酶最适作用pH为7.5,最适作用温度为30℃;Ca2+,Mg2+,Zn2+不同程度提高酶活性,Cu2+,Co2+,Mn2+,Fe2+,Fe3+严重抑制酶活性。当以5%DM-SO为助剂,消旋扁桃酸甲酯20 mg,GXU33脂肪酶1500 U,25 mmol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5)加至总体积2 mL,32℃,100 r/min,反应8h,得到最佳拆分效果:转化率为44.8%,(S)-扁桃酸对映过量值为83.5%。
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