【摘 要】
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对含伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus,PrV)Ea株gD基因部分编码序列,gI、gE和11k基因全序列、28k基因部分序列的质粒pSKB4.5进行亚克隆,构建了只含完整gE基因(长1.78kb)的重组质
【机 构】
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华中农业大学动物病毒室; 华中农业大学动物病毒室 湖北武汉430070; 湖北武汉430070; 湖北武汉430070;
【基金项目】
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“九五”国家科技攻关计划生物技术项目(96-C01-04-03)
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对含伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus,PrV)Ea株gD基因部分编码序列,gI、gE和11k基因全序列、28k基因部分序列的质粒pSKB4.5进行亚克隆,构建了只含完整gE基因(长1.78kb)的重组质粒pSDM1.78+,并采用双脱氧末端终止法对全序列进行了分析,发现同国外标准毒株Rice株相比较,在核苷酸和氨基酸水平均存在一定程度的差异。进一步将gE基因克隆到高效真核表达载体pcDNA3.1+的KpnI和BamHI位点之间,构建了gE基因的真核表达质粒pcDNA-gE。体外转染 IBRS-2细胞,经间接免疫荧光法检测证实了gE基因在IBRS-2细胞中得到了表达,表达的蛋白具有生物学活性。
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