【摘 要】
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目的研究大鼠皮肤肌肉特异性基因的表达,探讨引物的不同、退火温度变化与扩增产物特异性之间的关系。方法12只健康雄性Sprague-Dawley大鼠分为正常对照组与实验组(挫伤4h)。分
【基金项目】
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山西省留学回国人员科研基金资助项目(200528),山西省青年科研基金资助项目(2007021047)
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目的研究大鼠皮肤肌肉特异性基因的表达,探讨引物的不同、退火温度变化与扩增产物特异性之间的关系。方法12只健康雄性Sprague-Dawley大鼠分为正常对照组与实验组(挫伤4h)。分别提取总RNA,反转录成cDNA,通过不同引物、退火温度及反应体系进行PCR产物扩增,比较不同条件下差异条带的情况。结果总RNA量在2-4μg时,扩增条带最亮;提高反转录温度有利于长片段cDNA的合成;使用TaKaRa公司带有T7启动子的OligodT12NM和M13的随机引物时,可最大限度地减少非特异性条带;先使用低严谨的退
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