【摘 要】
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目的 探讨补中益气汤对PC12细胞线粒体DNA(mtDNA)部分缺失模型的保护作用及其分子机制.方法 利用神经细胞株PC12细胞,溴化乙锭诱导法制备mtDNA部分缺失模型.将PC12细胞分为4
【机 构】
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北京中医药大学中医学院,北京 100029;首都医科大学附属北京地坛医院,北京 100020
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目的 探讨补中益气汤对PC12细胞线粒体DNA(mtDNA)部分缺失模型的保护作用及其分子机制.方法 利用神经细胞株PC12细胞,溴化乙锭诱导法制备mtDNA部分缺失模型.将PC12细胞分为4组:正常组、模型组、达纳康组、补中益气汤组.给药24 h后,CCK-8法检测各组细胞线粒体活性;比色法检测线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性及ATP含量;RT-PCR法检测各组线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)表达.结果 500 ng/mL浓度溴化乙锭能够使细胞mtDNA拷贝数下降(P<0.01)造成PC12细胞mtDNA部分缺失.与正常组相比,模型组细胞线粒体活性和呼吸链复合物Ⅰ-Ⅳ活性降低(P<0.05,P<0.01),ATP含量减少(P<0.01),TFAM基因表达量下降(P<0.01).与模型组相比,补中益气汤组线粒体活性显著升高(P<0.01),呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ活性有所升高(P<0.05,P<0.01),ATP含量和TFAM基因表达量增加(P0.05).结论 补中益气汤对溴化乙锭所致mtDNA部分缺失模型具有保护作用,可显著改善线粒体的代谢功能,其机制可能与上调TFAM表达有关,这可能是补中益气汤发挥“补气”功能的现代生物学基础.
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