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对标题化合物的合成进行了系统研究,以4-硝基邻苯二甲酸、间苯二酚为原料,甲磺酸为缩合剂,乙酸酐为酰化剂、九水硫化钠为还原剂,经缩合、乙酰化、还原制得5-氨基荧光素,再在二硫化碳-三乙胺-铁盐体系下经异硫氰酸化制得。目标产物结构经1HNMR、13CNMR、MS及IR表征,并测试了其荧光性能。与文献报道醇碱皂化再还原路线相比,采用“一锅法”合成5-氨基荧光素减少分离纯化合成步骤与设备数量,具有效率高、成本低、绿色环保等优点。