【摘 要】
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目的探讨藤黄酸(GA)颗粒对结肠癌干细胞增殖和凋亡的影响。方法通过体外培养结肠癌HCT116细胞,采用免疫磁珠标记分选技术从HCT116细胞中分选出ALDH1~+/CD133~+结肠癌干细胞;
【机 构】
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广州市第八人民医院消化内科,广州市第一人民医院消化内科
【基金项目】
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广东省科技计划项目(2017A020215009)
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目的探讨藤黄酸(GA)颗粒对结肠癌干细胞增殖和凋亡的影响。方法通过体外培养结肠癌HCT116细胞,采用免疫磁珠标记分选技术从HCT116细胞中分选出ALDH1~+/CD133~+结肠癌干细胞;经不同浓度(0、0.5、1和2 mg/ml)GA颗粒处理结肠癌干细胞后,采用克隆形成实验观察细胞的克隆能力,CCK-8法检测细胞的增殖能力,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,Western blotting及实时定量PCR(QPCR)检测干细胞中Sox2和Oct4蛋白及m RNA的表达。结果免疫磁珠标记分选技术成功分选出符合要求的ALDH1~+/CD133~+结肠癌干细胞;克隆形成实验结果显示,不同浓度GA颗粒处理后细胞克隆形成率显著降低,且呈剂量依赖性;CCK-8检测发现,GA颗粒能够呈剂量-时间依赖性地抑制结肠癌干细胞的增殖;流式细胞仪检测结果表明,GA颗粒能够呈剂量依赖性地诱导结肠癌干细胞的凋亡;Western blotting及QPCR检测结果显示,GA颗粒能够呈剂量依赖性地降低Oct4和Sox2蛋白及m RNA水平。结论 GA颗粒能够明显抑制结肠癌干细胞的克隆、增殖及Oct4和Sox2的表达并诱导细胞凋亡。
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