【摘 要】
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目的探讨合成的稳定化合物八氢贯叶金丝桃素乙酸酯[(8H)-Ac-HF]对皮层原代神经元细胞中淀粉样前体蛋白(APP)水解途径的影响及其作用机制。方法建立SD大鼠皮层原代神经元细胞
【机 构】
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中山大学药学院,广东药学院药科学院,中山大学实验动物中心
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目的探讨合成的稳定化合物八氢贯叶金丝桃素乙酸酯[(8H)-Ac-HF]对皮层原代神经元细胞中淀粉样前体蛋白(APP)水解途径的影响及其作用机制。方法建立SD大鼠皮层原代神经元细胞体外培养体系,用MTT法检测(8H)-Ac-HF对原代神经元细胞的生长活力影响;用ELISA方法检测(8H)-Ac-HF对原代神经元细胞培养上清液中可溶性淀粉酶前体蛋白α(sAPPα)分泌及α-分泌酶活性的影响;用Western blot检测(8H)-Ac-HF对解聚金属蛋白酶10(adisintegrin and metalloprotease,ADAM10)蛋白表达的影响;并通过蛋白激酶C(PKC)抑制剂calphostinC(Cal.C)观察其可能作用的信号途径。结果 0～50μmol/L(8H)-Ac-HF处理皮层神经元30 h对细胞生长活性无显著影响;20、50μmol/L(8H)-Ac-HF可增加神经元细胞sAPPα的胞外分泌(P<0.01),增加α-分泌酶活性,上调ADAM10蛋白的表达;其对sAPPα、ADAM10和α-分泌酶的上调作用可受PKC抑制剂Cal.C抑制。结论 (8H)-Ac-HF可通过PKC信号途径,增加ADAM10表达及α-分泌酶活性,促进APP经非淀粉样途径水解。
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