【摘 要】
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目的 探讨褪黑素(MLT)对视网膜母细胞瘤(RB)HX0-RB44细胞增生活性的影响及相关机制。方法利用四氮唑化合物(MTT)比色法,观察不同浓度的MLT对RBHXO-RB44细胞增生活性的影响;利用10^-10、10^-9、10^-8、10^-7mmol/L的MLT对RBHXO-RB4;分别进行干预,采用Hoechst荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化;利用流式细胞仪测定不同浓度的MLT干预24h
【机 构】
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赣南医学院第一附属医院眼科,中南大学湘雅二医院眼科,长沙410011,赣南医学院第一附属医院眼科,赣南医学院第一附属医院眼科,赣南医学院第一附属医院眼科
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目的 探讨褪黑素(MLT)对视网膜母细胞瘤(RB)HX0-RB44细胞增生活性的影响及相关机制。方法利用四氮唑化合物(MTT)比色法,观察不同浓度的MLT对RBHXO-RB44细胞增生活性的影响;利用10^-10、10^-9、10^-8、10^-7mmol/L的MLT对RBHXO-RB4;分别进行干预,采用Hoechst荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化;利用流式细胞仪测定不同浓度的MLT干预24h后,RBHXO-RB44细胞内活性氧(ROS)的表达、细胞周期与凋亡情况。结果浓度为10^-7mmol/L以下的MLT对HXO-RB44。细胞并无抑制作用(P值均〉0.05)。10^-6mmol/L以上的MLT能够显著抑制HXO-RB44细胞增生(P〈0.01)。浓度为10^-6、10^-5、10^-4mmol/L的MLT干预后,随药物浓度的升高,HXO-RB44细胞内ROS的表达逐渐升高。Hoechst染色显示:不同浓度的褪黑素分别作用于培养的HXO-RB44细胞4、8、12、24h后,细胞核固缩、核碎裂增多,细胞凋亡的程度随着MLT浓度的增大而加重。流式细胞仪检测:药物干预后,G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,G。/M期细胞相对增多,随着MLT浓度的升高,HXO-RB。。细胞凋亡率明显升高。结论浓度大于10^-6mmol/L的MLT能够有效地抑制HXO-RB44细胞增生,其抑制效率随药物浓度的升高和作用时间的延长而增强;MLT的抗细胞增殖作用可能与其诱导HXO-RB44细胞内的活性氧产生、阻滞细胞周期于G0/G1期并诱导细胞凋亡有关。
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