【摘 要】
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目的探讨清除肾组织巨噬细胞对补体C3缺失单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾间质纤维化结局的影响及其机制。方法8~12周龄的C57BL/6野生型（WT）和补体C3基因敲除（C3KO）小鼠用随机数字表法分为：野生型小鼠假手术组（WT/sham）；野生型小鼠UUO模型组（WT/UUO）；补体C3基因敲除小鼠假手术组（C3KO/sham）；补体C3基因敲除小鼠UUO模型组（C3KO/UUO），每组18只。左侧
【机 构】
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目的探讨清除肾组织巨噬细胞对补体C3缺失单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾间质纤维化结局的影响及其机制。
方法8~12周龄的C57BL/6野生型（WT）和补体C3基因敲除（C3KO）小鼠用随机数字表法分为：野生型小鼠假手术组（WT/sham）；野生型小鼠UUO模型组（WT/UUO）；补体C3基因敲除小鼠假手术组（C3KO/sham）；补体C3基因敲除小鼠UUO模型组（C3KO/UUO），每组18只。左侧输尿管结扎法建立UUO模型。免疫组化法检测UUO术后梗阻侧肾组织补体C3的表达；免疫荧光法检测肾间质F4/80阳性巨噬细胞的分布和数量；Masson及HE染色观察肾组织病理改变，比较肾间质胶原纤维面积和肾小管-间质损伤指数评分。分别用巨噬细胞清除剂氯磷酸二钠（CLO）脂质体在UUO早期或晚期处理WT/UUO和C3KO/UUO组小鼠，观察肾间质巨噬细胞数量和肾间质纤维化的改变。F4/80和iNOS免疫双荧光、F4/80和CD206免疫双荧光观察WT/UUO和C3KO/UUO组术后巨噬细胞表型及M1/M2型巨噬细胞的比例。Western印迹法检测肾组织巨噬细胞标志蛋白诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶-1（Arg-1）、甘露糖受体（CD206）的表达。
结果与WT/UUO组比较，C3KO/UUO组小鼠肾间质胶原纤维面积减少，肾小管-间质损伤指数评分降低（均P<0.01），肾间质纤维化程度减轻。巨噬细胞清除剂早期或晚期处理后，WT/UUO组肾脏纤维化程度均较空白脂质体组减轻；C3KO/UUO组肾脏纤维化程度与空白脂质体组相比无明显改善。C3KO/UUO组早期肾组织M1型巨噬细胞占比及其标志蛋白iNOS较WT/UUO组表达降低，M2型巨噬细胞占比及其标志蛋白Arg-1、CD206表达增加（均P<0.01）。
结论补体C3基因敲除的UUO小鼠清除巨噬细胞后肾脏纤维化程度无明显改善，其机制与补体C3缺失影响肾组织巨噬细胞极化表型有关。
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