真核表达载体pIRES2-EGFP-AMH的构建及鉴定

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目的 构建人AMH基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-AMH.方法 从COV434细胞中获取AMH基因片段,经EcoRI、BglH双酶切定向克隆至载体pIRES2-EGFP,构建pIRES2-EGFP-AMH.经双酶切和测序鉴定后转染COV434细胞,通过荧光定量PCR和细胞免疫荧光技术检测AMH基因的表达变化.结果 重组人AMH真核表达质粒经酶切和测序鉴定正确,转染后能显著提高AMH mRNA和蛋白的表达.结论 人AMH真核表达载体构建成功,为进一步研究人AMH基因的功能提供初步的实验基础.
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