【摘 要】
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为建立快速鉴别蓝舌病病毒血清29型(BTV-29)的方法,根据BTV-29型毒株基因节段2(Seg-2)的序列特征,分别设计用于RT-PCR与qRT-PCR方法的特异性引物与TaqMan探针,通过试验确定其敏感性,用BTV-1～BTV-24等核酸作为对照评价其特异性.对BTV-29感染动物血液样本中的病毒核酸进行监测,并用BTV群特异qRT-PCR方法验证其可靠性.结果 显示,建立的BTV-29特异RT-PCR的灵敏度是1.12×102 copies/μL,而BTV-29特异qRT-PCR的灵敏度是1.1
【机 构】
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云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室,云南昆明650224;云南农业大学动物医学院,云南昆明650201;新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆乌鲁木齐830011;云南省畜牧兽医科学院云
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为建立快速鉴别蓝舌病病毒血清29型(BTV-29)的方法,根据BTV-29型毒株基因节段2(Seg-2)的序列特征,分别设计用于RT-PCR与qRT-PCR方法的特异性引物与TaqMan探针,通过试验确定其敏感性,用BTV-1～BTV-24等核酸作为对照评价其特异性.对BTV-29感染动物血液样本中的病毒核酸进行监测,并用BTV群特异qRT-PCR方法验证其可靠性.结果 显示,建立的BTV-29特异RT-PCR的灵敏度是1.12×102 copies/μL,而BTV-29特异qRT-PCR的灵敏度是1.12×101 copies/μL,均与BTV-1～BTV-24、流行性出血病病毒、帕利亚姆病毒和阿卡斑病毒之间无交叉反应;用BTV-29特异qRT-PCR检测BTV-29型感染山羊血液中的BTV-29核酸的动态变化,结果与BTV群特异qRT-PCR检测结果基本一致.本研究建立的BTV-29特异RT-PCR和qRT-PCR方法均具有良好的特异性和较高的灵敏度,能快速鉴别BTV-29,为BTV-29的致病性、诊断与流行病学研究提供了技术保障.
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