高温碱性条件下漆酶活力测试方法的研究

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用带控温装置的紫外可见光谱仪作为高温酶活检测平台,建立了以2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)为底物的高温、碱性漆酶活力测试方法,着重探讨了ABTS游离基(ABTS·+)消减对测试的影响,结果表明,本测试系统可供进行83℃以下动力学光谱分析,可用于漆酶的耐温、耐碱性研究,宜采用低离子浓度(4 mmol/L)缓冲液做介质,测试时长1 min,按此条件,在pH 4、7和10时,因ABTS·+消减而产生的误差绝对值分别低于1%,1.5%和5%。使用该系统测得诺维信漆酶最适pH为4.5、最适温度为60℃,还从三种担子菌漆酶中筛选出具有较高耐温性的乌芝酶。
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