【摘 要】
:
目的基因工程方法建立人醛糖还原酶基因(AR)的蛋白分子模型,并将该模型应用于中草药AR抑制剂的初步筛选。方法将含基因AR及融合基因AR∷GFP的重组质粒pcDNA3.1/myc-His-AR及p
【机 构】
:
中国人民解放军总医院老年医学研究所,中国人民解放军总医院感染管理与疾病控制科,中国中医研究院中药研究所
论文部分内容阅读
目的基因工程方法建立人醛糖还原酶基因(AR)的蛋白分子模型,并将该模型应用于中草药AR抑制剂的初步筛选。方法将含基因AR及融合基因AR∷GFP的重组质粒pcDNA3.1/myc-His-AR及pcDNA3.1/myc-His-AG瞬时转染HEK293细胞,分别命名为HAR、HAG细胞株。通过荧光显微镜观察AR∷GFP的绿色荧光直接判断转染效果及估计基因AR的表达;Western blot、紫外分光光度法检测AR蛋白表达及AR酶活性。应用此HAR模型对黄芩苷等5种中草药进行初步筛选,并与经典AR抑制剂Sorbinil、Zopolrestat的抑制效果比较。结果GFP绿色荧光表达丰富,表明质粒转染效率较高;Western blot和紫外分光光度法显示:转染后HEK293细胞中AR蛋白表达量高,AR酶活性强(空白对照的2.5倍)。AR抑制剂筛选实验揭示,黄芩苷、虎杖苷、蕨麻多糖JM等中草药表现出与Sorbinil相近的AR抑制活性。结论AR的蛋白分子模型成功建立,此模型可得到较大量高活性AR酶蛋白,并可应用于AR抑制剂的初步稳定筛选;黄芩苷、虎杖苷、蕨麻多糖JM等中草药显示出潜在的AR抑制活性。
其他文献
目的确定巨噬细胞是枸杞糖缀合物和糖链免疫作用的靶细胞之一。方法应用中性红吞噬实验和鸡红细胞吞噬实验测定了枸杞糖缀合物LbGp4和糖链LbGp4-OL对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功
利用计算流体力学方法通过数值模拟分析了XJM-S8型浮选机的液流运动状态和湍流运动特征,得出如下结论:XJM-S8型浮选机槽内湍动能、湍流强度、湍流耗散率关于叶轮中心呈对称分
随着社会主义市场经济体制改革的深入,全球化发展趋势不可逆转,众多企业经历全球经济环境的严峻挑战,企业只有强化内部控制,防范财务风险,做好财务会计管理,降低成本,才能在
听力教学是高中英语教学的重要组成部分,听力水平的提高对学生英语素质的全面提高起着至关重要的作用。笔者结合三年从教经验,对听力教学中存在的问题进行反思研究,以期提高
收入是衡量企业财务业绩的关键指标之一,也是评价企业核心盈利质量的重要指数,所以企业财务舞弊中收入舞弊占有相当高的比例。财务舞弊是严重的经济违法行为,对企业、对整个
郑廷玉是元代颇具特色的著名曲家。从其创作方法来看,郑廷玉的杂剧呈现出特有的美学意蕴。他把现实主义和浪漫主义有机结合在一起,在现实生活和魔幻空间中去探寻社会,求索人
<正>【教材简析】课文讲述了一位重病缠身的母亲,体贴入微地照顾双腿瘫痪的儿子,鼓励儿子要好好活下去的故事,歌颂了伟大而无私的母爱。作者史铁生借助对几件平常小事的细致
当前北京农产品流通中存在商物不分离的现状,流通主体多数规模不大,缺乏资源整合,分散经营与自营物流造成流通成本偏高。为了研究如何从物流体系构建方面降低农产品流通成本,
"二十四友"是西晋时出现的与政治相关的文士组成的团体,而与之形式类似的以"×友"为名的称号在魏晋南北朝尤其多,它们都是由先秦时寄托了政治理想的贤辅演化而来。本文通过对
房地产市场是我国市场经济体制中最具典型代表性的行业市场。土地资源稀缺性的特点决定了房地产行业市场的相对垄断性,房地产业在社会经济发展中极其重要,尤其是对资本积累意