新疆巴什拜羊ISG15基因的克隆表达及活性检测

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克隆表达新疆巴什拜羊ISGl5基因,并对其表达产物的活性进行检测。利用RT—PCR和RACE技术克隆了巴什拜羊ISGl5基因的cDNA全长序列,将ISG15基因克隆至真核表达载体pPIC9K,经电击转化至GS115中并用甲醇进行诱导表达,用Ni2+螯合亲和层析法对表达的蛋白进行纯化,通过淋巴细胞转化试验来检测表达蛋白的活性。结果表明:克隆得到的巴什拜羊ISG15基因cDNA全长为646bp,开放阅读框为474bp,编码157个氨基酸。经酵母重组菌株GS115/pPIC9K—ISG15表达,SDS—PAGE
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