【摘 要】
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目的:利用蛋白组学、代谢组学和实时荧光定量PCR技术研究腐败希瓦氏菌净化水产品加工废水的生物学机制,挖掘相关功能蛋白,为食品加工废水治理提供理论依据。方法:以淡水培养
【基金项目】
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海洋公益性行业专业专项资助项目(201105007);浙江省重大科技攻关项目(2006C13089);宁波市科技局资助项目(2008C50027)
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目的:利用蛋白组学、代谢组学和实时荧光定量PCR技术研究腐败希瓦氏菌净化水产品加工废水的生物学机制,挖掘相关功能蛋白,为食品加工废水治理提供理论依据。方法:以淡水培养为对照,宁波象山石浦水产品加工园区排污口处废水培养为试验组,应用双向电泳(2-DE)技术筛选2种培养的腐败希瓦氏菌功能蛋白;利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术验证基因表达情况;核磁共振(NMR)技术鉴定菌体胞内代谢产物。结果:双向电泳筛选出31个差异蛋白,表达差异1.5倍以上的蛋白22个,最大差异比率为12.1。采用MALDITOF-MS-MS技术进行蛋白定性,GO和KEGG分析,其差异蛋白涉及铁代谢、ABC转运系统、抗生素合成、硫代谢、谷胱甘肽合成等。选取11个基因进行q RT-PCR,7个基因与蛋白表达水平一致,4个基因呈现负相关。NMR检出10类59种胞内代谢产物,其中腐胺、乙酸盐等8种代谢物的表达差异较大。结论:与净化水产品加工废水相关的功能蛋白2个,即半胱氨酸合酶和异柠檬酸脱氢酶。这两种酶在降解无机硫、重金属解毒、清除自由基,抵御氧化性损伤等方面发挥关键的作用,有望将其应用于废水治理。
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