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目的
探讨miRNA-30a-3p通过靶向作用Caspase 1介导的焦亡,抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和转移。
方法利用qRT-PCR和免疫组化染色检测肝癌组织中miR-30a-3p和Caspase 1的表达。用肝癌细胞SMMC-7721转染miR-30a-3p激动剂、抑制剂及Caspase 1特异性抑制剂。Western blot检测EMT(epithelial mesenchymal transition)相关蛋白(N-cadherin、vimentin、snail、MMP-2)和Caspase 1、IL-18和IL-1β蛋白表达量。平板克隆、CCK-8和Transwell实验检测肝癌细胞增殖、转移能力。
结果肝癌组织中Caspase 1高表达(t=17.54,P<0.05)。过表达miR-30a-3p能抑制肝癌细胞增殖和转移能力,而抑制miR-30a-3p表达可提高肝癌细胞增殖和转移能力。过表达miR-30a-3p可降低Caspase 1表达(t=12.73,P<0.05),抑制焦亡诱导,进而抑制炎症介质IL-18(t=3.51,P<0.05)和IL-1β(t=7.32,P<0.05)表达。抑制miRNA-30a-3p表达,活性肝癌细胞数量增加(F1=9.57,P<0.05);而miRNA-30a-3p和Caspase 1联合抑制活性肝癌细胞数量则减少(F2=10.66,P<0.05)。
结论Caspase 1在肝癌组织中高表达,miRNA-30a-3p通过作用Caspase 1通路以调节细胞焦亡,进而抑制肝癌细胞增殖侵袭和转移。