【摘 要】
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目的 探讨新型含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽K16RGDSPC修饰聚丙交酯-CO-乙交酯(PLGA)-[ASP-PEG]支架材料对骨髓基质干细胞(BMSCs)在其表面黏附、增殖及成骨分化的影响.方
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目的 探讨新型含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽K16RGDSPC修饰聚丙交酯-CO-乙交酯(PLGA)-[ASP-PEG]支架材料对骨髓基质干细胞(BMSCs)在其表面黏附、增殖及成骨分化的影响.方法 固相合成法合成K16GRGDSPC并通过质谱仪和高压液相色谱进行鉴定.用交联剂Sulfo-LC-SPDP将K16GRGDSPC接枝到PLGA-[ASP-PEG]支架材料上,通过XPS图谱检测接枝反应的发生.将改性后的PLGA-[ASP-PEG]支架材料与兔BMSCs在成骨诱导培养基中复合培养,以未改性的支架材料作对照.通过沉淀法、微管吮吸法、MTT法和考马斯亮蓝法分别检测BMSCs的黏附和增殖性能的变化;应用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测BMSCs的ALP表达水平并通过RT-PCR检测细胞ALP、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ型胶原的表达,通过免疫荧光染色检测核心结合因子a1(Cbfa1)表达,观察BMSCs向成骨细胞方向分化的情况.结果 XPS图谱证实含RGD肽K16GRGDSPC被成功地接枝到PLGA-[ASP-PEG]表面.复合BMSCs培养结果表明,改性后的PLGA-[ASP-PEG]表面BMSCs的黏附性能和增殖能力明显提高,而且其成骨标志物(ALP、OCN、OPN、Ⅰ型胶原和Cfba1)的表达均显著高于对照组(P＜0.05).结论 含RGD肽K16GRGDSPC能促进BMSCs在骨基质材料表面的黏附、增殖并诱导其向成骨方向分化.
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