【摘 要】
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目的 研究天麻素(GAS)对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 用含体积分数10％ 胎牛血清的DMEM培养基于37℃、体积分数5％CO2的细胞培养箱中培养T98G细胞,实验分为0,2.5,5.0,10μmol·L-1天麻素组和control组、GAS组、GAS+Vector组、GAS+HOTAIR组.以细胞计数法(CCK-8)试剂盒检测细胞增殖情况;以流式细胞术检测细胞凋亡率情况;以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HOTAIR的表达;以蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白表达水平.结
【机 构】
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甘肃省定西市人民医院 药学部,甘肃 定西743000
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目的 研究天麻素(GAS)对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 用含体积分数10％ 胎牛血清的DMEM培养基于37℃、体积分数5％CO2的细胞培养箱中培养T98G细胞,实验分为0,2.5,5.0,10μmol·L-1天麻素组和control组、GAS组、GAS+Vector组、GAS+HOTAIR组.以细胞计数法(CCK-8)试剂盒检测细胞增殖情况;以流式细胞术检测细胞凋亡率情况;以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HOTAIR的表达;以蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白表达水平.结果 0,2.5,5.0,10μmol·L-1天麻素组培养72 h后细胞OD值分别为1.03±0.10,0.86±0.05,0.72±0.06,0.52±0.09,天麻素可显著抑制T98G细胞增殖,且具有浓度依赖性;0,2.5,5.0,10μmol·L-1天麻素组细胞凋亡率分别为(8.85±1.19)％,(13.57±1.38)％,(17.78±1.72)％,(22.17±1.82)％,天麻素可显著抑制T98G细胞凋亡,且具有浓度依赖性.Control组、GAS组、GAS+Vector组和GAS+HOTAIR组的细胞凋亡率分别为(9.38±1.02)％、(21.16±1.69)％、(21.51±1.20)％和(9.98±1.18)％,HOTAIR表达水平分别为1.00±0.07,0.33±0.03,0.34±0.04,0.78±0.06,天麻素可通过HOTAIR诱导T98G细胞凋亡,可下调HOTAIR表达水平;天麻素可显著下调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1蛋白表达水平,上调p62蛋白表达水平.GAS组与Control组比较,GAS+HOTAIR组与GAS+Vector组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 天麻素可以通过长链非编码RNA HOTAIR调节自噬,促进胶质瘤细胞凋亡.
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