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目的构建查菲埃立克体特异性表面抗原P120基因的原核表达质粒,并使该基因在E.coli中高效表达。方法依据查菲埃立克体P120基因序列设计一对特异性引物,用PCR从查菲埃立克体的基因组中扩增含有编码P120抗原决定簇的基因片段,而后将PCR产物用T载体克隆。用酶将PCR产物从T载体切下,将它定向插入原核表达质粒PET11C构建PET11C/p120重组质粒;用重组质粒转化E.coli BL21(DE3)。结果从DNA片断中扩增出一约1 119 bp产物,经测序为查菲埃立克体p120基因。PET11C/p1