【摘 要】
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目的 检测体外培养人关节软骨细胞在间断剪切力作用下细胞增殖、Ⅱ型胶原mRNA表达和聚集蛋白聚糖mRNA表达的变化,观察流体剪切力对人关节软骨细胞代谢的影响.方法 将传代的第
【机 构】
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武汉大学人民医院骨科,武汉大学中南医院骨科
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目的 检测体外培养人关节软骨细胞在间断剪切力作用下细胞增殖、Ⅱ型胶原mRNA表达和聚集蛋白聚糖mRNA表达的变化,观察流体剪切力对人关节软骨细胞代谢的影响.方法 将传代的第2代软骨细胞分为载荷组和对照组,载荷组按40 r/min每天置于摇床上处理2 h,每天2次;对照组置于培养箱中静止培养.通过噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,免疫组织化学法检测软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Ⅱ型胶原mRNA表达和聚集蛋白聚糖mRNA表达.结果 MTT法测得载荷组吸光度值为0.58±0.05,对照组为0.42±0.06,载荷组吸光度值高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).Ⅱ型胶原免疫组织化学检测所得平均吸光度(A)值为:对照组0.184 60±0.036 32,载荷组0.306 10±0.053 00,载荷组Ⅱ型胶原平均吸光度高于控制组,差异有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR法检测结果 显示对照组和载荷组Ⅱ型胶原mRNA吸光度比值分别为0.080±0.006和0.150±0.005,聚集蛋白聚糖mRNA吸光度比值分别为0.100±0.004和0.230±0.004,载荷组均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 一定强度流体剪切力能够促进人关节软骨细胞的增殖及代谢,使其合成Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖增多.
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