【摘 要】
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目的 探讨蔗糖铁刺激对肾小管上皮细胞纤维化的影响及其机制.方法 使用0.1 mmol/L的蔗糖铁分别刺激HK-2细胞12h、24 h、36 h,亚铁离子探针FeRhoNox及羟自由基探针(hydroxyphe
【机 构】
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解放军总医院第一医学中心肾内科解放军肾脏病中心暨肾脏病国家重点实验室,北京,100853;复旦大学药学院,上海,201203
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目的 探讨蔗糖铁刺激对肾小管上皮细胞纤维化的影响及其机制.方法 使用0.1 mmol/L的蔗糖铁分别刺激HK-2细胞12h、24 h、36 h,亚铁离子探针FeRhoNox及羟自由基探针(hydroxyphenyl fluorescein,HPF)检测HK-2细胞内亚铁及羟自由基含量,Western blot法检测细胞TGF-β1、Collagen Ⅰ、CollagenⅣ、Fibronectin蛋白表达.结果 荧光半定量分析显示,0.1 mmol/L蔗糖铁刺激HK-2细胞12h后,细胞内亚铁离子是对照组的(8.7±1.2)倍(P＜0.01),细胞内羟基是对照组(9.0±1.0)倍(P＜ 0.01);24 h后细胞内亚铁离子是对照组的(8.6±1.2)倍(P＜0.01),细胞内羟基是对照组的(9.2±0.5)倍(P＜0.01);36 h后细胞内亚铁离子是对照组的(8.8±0.8)倍(P＜0.01),细胞内羟基是对照组的(8.6±1.0)倍(P＜0.01).0.1mmol/L蔗糖铁刺激HK-2细胞24 h和36h后,TGF-β1、Collagen Ⅰ、CollagenⅣ、Fibronectin的表达明显增加.结论 0.1mmol/L的蔗糖铁刺激HK-2细胞增加细胞内氧化应激,与细胞纤维化相关.
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