【摘 要】
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目的:探讨缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)对非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)吉非替尼原发性耐药的影响。方法:MTT法测定吉非替尼对3株非突变型EGFR(WT-EG
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目的:探讨缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)对非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)吉非替尼原发性耐药的影响。方法:MTT法测定吉非替尼对3株非突变型EGFR(WT-EGFR)NSCLC细胞系A549、H1299、Calu3细胞的半数抑制浓度(IC50);Western blot观察Cx43、磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)蛋白在上述细胞系中的表达水平;"Parachute"法检测细胞缝隙连接功能(gap junction intercellular communication,GJIC);免疫荧光法检测Cx43蛋白在细胞中的定位。结果:吉非替尼作用于Calu3、A549、H1299细胞的IC50分别为(0.064±0.011)μmol/L、(13.64±0.015)μmol/L、(20.054±0.012)μmol/L,即A549、H1299细胞对吉非替尼原发性耐药;A549、H1299细胞中Cx43、p-Akt蛋白水平显著高于Calu3细胞(P<0.01);A549、H1299细胞有荧光传递现象,且Cx43蛋白定位在A549、H1299细胞膜上,而Calu3细胞无荧光传递现象,且Cx43主要表达于细胞质上。结论:NSCLC细胞膜上调的Cx43及其组成的GJIC可促进细胞对吉非替尼的原发性耐药,其机制可能与其激活PI3K/Akt信号通路有关。
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