【摘 要】
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目的拟建立包含基因突变位点的真核表达载体,通过细胞转染了解RUNX2突变体亚细胞定位的改变。方法从患者全血中提取总RNA,通过反转录酶-聚合酶链反应获得目的片段,定向克隆获
【机 构】
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阳江市人民医院口腔科,广东省口腔医院,南方医科大学附属口腔医院
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目的拟建立包含基因突变位点的真核表达载体,通过细胞转染了解RUNX2突变体亚细胞定位的改变。方法从患者全血中提取总RNA,通过反转录酶-聚合酶链反应获得目的片段,定向克隆获得包含基因突变位点及野生型位点的pEGFP-C1-RUNX2真核表达载体,通过瞬时转染NIH3T3成纤维细胞,显微镜下观察突变蛋白的亚细胞定位变化。结果成功构建包含突变位点及野生位点的真核表达载体pEGFP-C1-RUNX2,转染细胞24 h后,在荧光显微镜下观察转染细胞内的荧光蛋白表达情况,转染野生型RUNX2基因的细胞仅在胞核内表达
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