内质网滞留型抗明胶酶胞内抗体的基因表达及对肿瘤细胞侵袭和增殖的抑制作用

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目的:明胶酶(包括MMP-2和MMP-9)在恶性肿瘤转移扩散中发挥着重要的作用,探讨运用胞内抗体技术通过胞内抗体与明胶酶结合,阻断明胶酶向细胞表面的分泌,对恶性肿瘤细胞侵袭转移抑制的效果.方法:构建可在真核细胞内质网表达抗明胶酶抗体基因的真核表达载体PcDNA3.1.ER.scFv,瞬时和稳定基因转染,Western blot 检测基因表达,免疫沉淀实验检测胞内抗体与靶蛋白结合情况,明胶酶谱检测明胶酶的分泌,用相关方法观察细胞体外运动、侵袭和增殖.结果:ER.scFv抗体基因在PG细胞内表达,能与靶蛋白M
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