【摘 要】
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目的建立人外周血单个核细胞来源的CD4+CD25+调节性T细胞体外扩增培养方法 ,研究体外扩增后细胞功能改变。方法 Ficoll-Paque密度梯度分离健康人外周血单个核细胞,免疫磁珠纯
【机 构】
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解放军第三军医大学基础部,解放军第三军医大学免疫学研究所,
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目的建立人外周血单个核细胞来源的CD4+CD25+调节性T细胞体外扩增培养方法 ,研究体外扩增后细胞功能改变。方法 Ficoll-Paque密度梯度分离健康人外周血单个核细胞,免疫磁珠纯化CD4+T细胞,流式分选CD4+CD25+调节性T细胞。用抗人CD3/CD28单抗和IL-2联合刺激CD4+CD25+调节性T细胞,检测其Foxp3、IL-10和TGF-β表达改变。结果人外周血单个核细胞分离纯化得到纯度98%的CD4+CD25+调节性T细胞,Foxp3表达率为95%;使用IL-2加抗CD3/CD28单抗刺激6周后细胞数量可扩增1 000倍;扩增后细胞Foxp3的表达和IL-10、TGF-β的分泌均显著降低。结论本研究成功建立了高纯度大量CD4+CD25+调节性T细胞纯化和体外扩增方法,研究了CD4+CD25+T细胞体外扩增后功能表型的改变。
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