【摘 要】
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为了研究不同方向的嵌合体内含子对重组神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)基因表达的影响,以人β-珠蛋白第一内含子5’端剪接序列和人免疫球蛋白重链可变区内含子3’端
【机 构】
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新乡医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室; 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心;
【基金项目】
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Science and Technology Research Projects of Henan Province(No.182102311184);National Natural Science Foundation of China(No.81673337)~~
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为了研究不同方向的嵌合体内含子对重组神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)基因表达的影响,以人β-珠蛋白第一内含子5’端剪接序列和人免疫球蛋白重链可变区内含子3’端剪接序列组合而成的嵌合体内含子作为研究对象,在NGF基因5’端插入不同方向的嵌合体内含子,构建含不同方向内含子的NGF基因表达载体。转染至CHO细胞后,G418筛选稳定转染的细胞,荧光定量PCR、ELISA和Western blotting检测不同载体NGF基因的表达情况。结果显示内含子可以大幅度提高NGF基因的表达,且正向内含子对NGF基因表达的增强作用无论是在mRNA水平还是在蛋白水平都要高于反向内含子。所以内含子能够提高外源NGF基因的表达,且内含子调控转基因表达具有方向性。
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