【摘 要】
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目的:实现Mn-SOD基因在大肠杆菌(E.coli)中的可溶性表达,并对表达产物进行活性测定。方法:用PCR方法从大肠杆菌2号基因组中扩增Mn-SOD基因编码区,克隆到pUCm-T Vector,测定核苷酸
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目的:实现Mn-SOD基因在大肠杆菌(E.coli)中的可溶性表达,并对表达产物进行活性测定。方法:用PCR方法从大肠杆菌2号基因组中扩增Mn-SOD基因编码区,克隆到pUCm-T Vector,测定核苷酸序列;再将基因编码区克隆到原核表达载体PET-28a,构建含Mn-SOD基因的重组表达质粒,转化到大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达。结果:SDS-PAGE分析表明SOD的表达量约为细菌总蛋白的50%;黄嘌呤氧化酶法测定表达蛋白活性,菌体可溶性总蛋白中表达产物酶比活为3921.8 U/mg,是对照B
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