目的:建立HPLC法同时测定复方黑骨藤中落干酸、6’-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷、獐芽菜苷、杠柳苷、延胡索乙素、四氢小檗碱、延胡索甲素9种有效成分的含量。方法:采用Kromasil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈（A）-0.05%三乙胺+乙酸水溶液（B,pH=6.0）为流动相,梯度洗脱（0⁵ min,5%A→8%A;5⁵.5 min,8%A→11%A;5.5²0 min,11%A;20³0 min,11%A→30%A;30⁴0 min,30%A→40%A;40⁴2 min,40%A→55%A;42⁵3 min,55%A→75%A）,流速1.2 m L·min^-1,柱温25℃,检测波长为206 nm（延胡索乙素、四氢小檗碱、延胡索甲素）、225 nm（落干酸和杠柳苷）、243 nm（獐牙菜苦苷和獐牙菜苷）和275 nm（6’-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷和龙胆苦苷）,进样量10μL。结果:落干酸、6’-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷、獐芽菜苷、杠柳苷、延胡索乙素、四氢小檗碱和延胡索甲素的质量浓度在一定范围内,与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率（n=6）分别为92.7%、90.9%、91.2%、94.9%、97.4%、94.6%、96.1%、90.9%和104.4%,RSD分别为2.1%、1.3%、1.1%、1.6%、0.7%、0.6%、1.8%、2.0%和1.4%;样品中上述9种成分含量范围分别为3.464³.535、1.133¹.178、0.373⁰.382、13.598¹4.142、0.109⁰.112、0.499⁰.510、0.114⁰.119、0.027⁰.028和0.163⁰.174 mg·g^-1。结论:经方法学验证,本方法可用于黑骨藤复方药物中9种有效成分的分析和含量测定,为复方黑骨藤药物的质量控制奠定基础。