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目的初步探索雌激素受体(ER)α和ERβ基因在青春期椎体生长板软骨细胞分化和增殖中相互作用,以及Smad4基因在ERα和ERβ调控软骨细胞Runx2和BMP2基因表达过程中的信号传递作用。方法设计ERα、ERβ和Smad4mRNA打靶的RNAi慢病毒载体并包装成为慢病毒颗粒。以小鼠椎体生长板软骨细胞为对象,采用分层设计的方法进行分组,分别转染目的基因RNAi载体,研究Smad4基因在椎板软骨细胞中介导ERα和ERβ调控Runx2和BMP2基因的表达的作用。分析各组细胞生长曲线;检测各组细胞Runx2、BMP2表达的变化。结果于转染后第3、5、7、9天时,各组细胞吸光度值(A490)在多个组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。各组间Runx2基因表达相对于空白对照组改变的倍数由高到低的顺序与细胞生长曲线基本相同。而BMP2基因表达由高到低的顺序与Runx2不同,多个亚组间差异有统计学意义(P<0.05)。然而,无论ERαRNAi组还是ERβRNAi组中,Smad4RNAi亚组与Smad4正常亚组比较,BMP2基因表达均差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ERα和ERβ均具有调控椎体生长板软骨细胞分化与增殖的作用,且ERα的调控作用大于ERβ。在ERα和ERβ均正常表达时,ERβ具有部分抑制ERα的功能;当ERα表达显著降低时,ERβ可以部分补偿ERα的功能。另外,ERβ通过Smad4信号传递增强软骨细胞Runx2基因表达,但还可能存在非Smad4信号传递通路。然而,ERα和ERβ对BMP2基因表达的调控并非通过Smad4信号传递