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目的:利用载体-宿主平衡致死系统,将1株香港分离的野生型沙门氏菌(S129)构建为减毒核酸疫苗载体。方法以细菌生化反应和血清学方法鉴定S129为鼠伤寒沙门氏菌;以λ-RED同源重组方法靶向敲除S129株的 asdA基因,并以卡那霉素抗性基因代替;通过菌落PCR鉴定后挑取阳性克隆 asdA缺陷型减毒鼠伤寒沙门氏菌(asdAΔS129),在含2,6-二氨基庚二酸(2,6-diaminopimelic acid ,DAP)或无DAP的LB培养基中培养,与野生株S129对比生长曲线以验证 asdAΔS129构建的