【摘 要】
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昆虫羧酸酯酶(carboxylesterases,COEs)在昆虫降解杀虫剂和代谢植物次生物质的过程中起重要作用.克隆了家蚕中肠特异表达的4个羧酸酯酶α-家族基因Bmae2、Bmae17、Bmae18和Bm
【机 构】
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重庆大学生命科学学院,重庆,400044
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昆虫羧酸酯酶(carboxylesterases,COEs)在昆虫降解杀虫剂和代谢植物次生物质的过程中起重要作用.克隆了家蚕中肠特异表达的4个羧酸酯酶α-家族基因Bmae2、Bmae17、Bmae18和Bmae27.序列分析表明Bmae2和Bmae17编码的蛋白质均具有酯酶活性必需的催化残基Ser、Glu、His以及α-酯酶/β-酯酶家族的特征基序Gly-x-Ser-x-Gly,而Bmae18与Bmae27编码蛋白质的Ser残基分别突变为Asp和Gly残基,推测Bmae2和Bmae17具有酯酶的水解活性.4龄起蚕分别添食4种浓度的槲皮素(quercetin)后,通过半定量RT-PCR和定量PCR检测4个COEs基因在各处理组家蚕中肠中的表达均有显著上调,最大诱导表达量分别为对照组的6.90、2.21、1.30、8.78倍.分别用亚致死剂量的有机磷农药辛硫磷、敌敌畏和毒死蜱处理5龄第2天幼虫,检测中肠COEs活性均显著增强.通过半定量RT-PCR和定量PCR检测发现:Bmae17和Bmae27在低浓度辛硫磷处理的3d内均上调表达,与酶活性检测结果基本一致,推测这2个基因可能主要参与了对辛硫磷的解毒作用；敌敌畏处理组家蚕只在处理第3天时中肠中的Bmae17、Bmae18和Bmae27的表达呈现诱导上调,在处理后的前2d呈现出表达被抑制或与对照组无显著差异的现象,毒死蜱处理组也出现了类似现象,与酶活性检测结果不完全一致,推测与在中肠表达的其它COEs参与了对这2种农药的解毒作用有关.研究结果为进一步深入研究家蚕中肠COEs基因的解毒机制奠定了一定基础.
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