【摘 要】
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为了提高MDCK细胞表面禽流感病毒（AIV）受体的水平,以12日龄的SPF鸡胚为试材,通过反转录PCR扩增唾液酸转移酶Ⅰ基因（St3galⅠ）,并将回收的片段插入到pMD18-T载体中。酶切pMD18-T-S
【机 构】
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山东省滨州畜牧兽医研究院博士后科研工作站,吉林大学博士后科研流动站,滨州学院生命科学系,山东省滨州畜牧兽医研究院,郑州大学生命科学院
【基金项目】
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山东省自然科学基金项目（ZR2012CL14）, 山东省滨州畜牧兽医研究院博士后科研基金项目（BSH2014001）
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为了提高MDCK细胞表面禽流感病毒（AIV）受体的水平,以12日龄的SPF鸡胚为试材,通过反转录PCR扩增唾液酸转移酶Ⅰ基因（St3galⅠ）,并将回收的片段插入到pMD18-T载体中。酶切pMD18-T-St3galⅠ和pCI-neo质粒,将目的片段进行连接,构建含有St3galⅠ基因的真核表达载体。利用脂质体介导法转染MDCK细胞,在G418的筛选下,获得具有抗性的转基因细胞系。通过细胞克隆化培养和PCR检测,筛选可稳定表达St3galⅠ基因的细胞株。结果表明,从鸡胚中克隆的St3galⅠ基因成功的插
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