【摘 要】
：
以P型PRSV-VPg(Papaya Ringspot Virus,VPg gene)基因为模板利用高保真酶通过两对引物(突变4个位点),PCR扩增获得一条276 bp和一条141 bp的两个小片段.以此为基础,利用长引物
【机 构】
：
海南大学,中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所
论文部分内容阅读
以P型PRSV-VPg(Papaya Ringspot Virus,VPg gene)基因为模板利用高保真酶通过两对引物(突变4个位点),PCR扩增获得一条276 bp和一条141 bp的两个小片段.以此为基础,利用长引物延伸和套叠PCR的方法,定点突变剩余5个位点,最后拼接获得W型PRSV-VPg基因.结果表明通过上述方案可以成功改造P型PRSV-VPg基因,获得与W型朋PRSV-VPg同源的目的基因,成功率为100%.该技术可以绕开传统的通过寻找毒源进行RT-PCR方法和人工合成方法获得病毒基因,其技术操作简单,且节约时间和成本,并在人工合成基因、多位点基因定点突变等方面具有很好的借鉴作用和应用价值.
其他文献
为研究高山美利奴羊新品种种质特性,对高山美利奴羊中心产区自然生态条件、品种特性、体形外貌、生产性能指标等进行了调查研究和统计分析.结果表明:高山美利奴羊成年公羊平
钙调神经磷酸酶是一种广泛存在于机体中的多功能的信号酶，其介导信号通路有利于调节心血管病的生理变化。本文主要综述了钙调神经磷酸酶的结构及其功能等，并分析了其对于心肌细
凉山半细毛羊是2009年10月通过国家畜禽品种委员会审定,并被正式命名的四川省第一个通过国家级新品种命名的人工培育的绵羊新品种.近年来,由于化学纤维生产技术突飞猛进,产品
1 引入无角陶赛特羊品种的背景和必要性凉山半细毛羊是我国培育的一个48 ～50支半细毛羊品种,品种培育曾获国家科技进步三等奖和四川省科技进步一等奖.2009年通过国家畜禽品种
目的:探讨汉化匹兹堡康复参与量表评定脑卒中患者康复参与的预测效度和信度,为其应用提供依据.方法:选取2010年8月-2012年10月间,在石家庄市中心医院康复医学一科住院接受康
目的多分辨率体绘制是解决海量数据体绘制的一种有效方法。但对于数据散乱分布、同质区域较小的体绘制数据(比如物探领域的地震信号数据),传统的基于香农熵或均方差的多分辨率方式均难以有效实现降低数据量的效果,为此提出了一种基于目标特征的多分辨率体绘制方法。方法以数据体中的目标特征为指导,适当降低非目标区域的分辨率,在尽可能不丢失其目标区域信息的情况下,实现有效的多分辨率体绘制。结果本文方法能够在目标保证数
目的 探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂丙戊酸(VPA)对脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠认知功能的影响.方法 采用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立SAE模型.成年雄性C57BL/6小鼠36只随机均
在疾病监控方面,酶联免疫吸附试验(ELISA)技术是应用最为广泛的血清学检测技术,禽病ELISA抗体检测试剂已经大量应用到SPF鸡微生物学监测中.ELISA不仅操作技术上有一定的要求,
研究发现引入少量二元羧酸能显著提高H2O2诱导氯仿光催化降解效率.研究了氯仿光催化降解的影响因素,得到了最佳降解条件:pH范围在3.5～4.5;H2O2为3～10 mg/L;Fe(Ⅲ)为0.2～0.45 mmo
研究转运膜蛋白21(TMP21)在小鼠胚胎成纤维细胞中超表达对PS-1及NCT蛋白表达量的影响.脂质体介导TMP21 cDNA转染敲除淀粉样前体蛋白表达基因的小鼠胚胎成纤维细胞系(MEF(KO))