检测裸露角质蛋白同源物2（naked cuticle homolog 2，Nkd2）在大鼠牙根形成和牙囊细胞成骨向分化过程中的表达变化，为探讨Nkd2在牙囊细胞成骨向分化中的具体分子机制提供实验基础。
方法免疫组化法检测Nkd2在SD大鼠出生后1、3、5、7、9、11及13 d下颌第一磨牙牙胚近基底侧牙囊组织中的表达。茜素红染色和十六烷基吡啶观察分析大鼠牙囊细胞（dental follicle cells of rat，rDFC）矿化诱导1、2、3周钙化结节形成情况。蛋白质印迹法分析rDFC矿化诱导1、2、3周Nkd2蛋白表达变化及其与成骨因子碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor-2，RUNX2）和骨钙蛋白的关系。小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）沉默rDFC中Nkd2（siRNA干扰组，Si组），经矿化诱导1周，蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）检测Si组、阴性对照组（阴性对照RNA组，negative control RNA group，Nc组）和空白对照组（mock control group，Mock组）Nkd2及其mRNA与ALP、RUNX2和骨钙蛋白的表达变化。
结果免疫组化结果显示，大鼠牙根形成中Nkd2在下颌第一磨牙牙胚基底侧牙囊组织中的表达呈现时间差异。随rDFC成骨诱导时间增加，茜素红染色矿化结节逐渐增多，十六烷基吡啶吸光度值逐渐增高（0、1、2、和3周吸光度值分别为0.017±0.005、0.702±0.044、1.812±0.531及2.767±0.253）。蛋白质印迹法结果显示，矿化诱导早期矿化组Nkd2（1.60±0.23）较对照组（1）表达显著上调（P<0.05），Nkd2表达趋势与成骨相关因子表达趋势一致。siRNA干扰rDFC矿化诱导1周后Si组较Nc、Mock组Nkd2和成骨因子在蛋白和mRNA水平显著降低（P<0.05），Nc与Mock组Nkd2和成骨因子表达差异无统计学意义（P>0.05）。Si、Nc和Mock组蛋白相对表达量分别为Nkd2：0.42±0.10、1.12±0.07、1；ALP：0.70±0.15、1.11±0.14、1；RUNX2：0.58±0.08、0.93±0.08、1；骨钙蛋白：0.64±0.06、0.99±0.02、1；Si、Nc和Mock组mRNA相对表达量分别为Nkd2：0.39±0.05、0.96±0.10、1；ALP：0.15±0.13、1.01±0.07、1；RUNX2：0.39±0.31、0.97±0.13、1；骨钙蛋白：0.17±0.08、1.08±0.21、1。
结论大鼠牙根形成过程中Nkd2参与了牙囊组织的分化，并正向调控大鼠牙囊细胞的早期成骨向分化。